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冰凍切片的實驗技巧—脂肪組織處理

點擊次數(shù)：13005 發(fā)布時間：2016/3/30 9:57:11

脂肪組織無疑是冰凍切片者的絆腳石，道理很簡單脂肪不會結(jié)冰，把溫度降低讓脂肪變硬可以切出較薄的片子，但是這個溫度對同一組織中的其他成分來說顯得太低而不合適切片，當(dāng)脂肪破碎影響切片時這個問題就變得明顯，下面讓我司錢經(jīng)理給大家講解下一些經(jīng)驗。
1.盡可能的削掉不需要的脂肪組織當(dāng)我準(zhǔn)備切淋巴結(jié)時，我會先檢查一遍，小心翼翼地除掉表面及髓內(nèi)的脂肪，結(jié)內(nèi)的脂肪用解剖刀刮擦掉，被膜線附近的脂肪用刀切除，這樣就不需要切開整個淋巴結(jié)被膜。有人會說，我把一些組織去掉后，可能導(dǎo)致漏判一些陽性的淋巴結(jié)，但我的經(jīng)驗是好的干凈的片子比含有太多脂肪的差片子更容易獲得陽性的結(jié)果。當(dāng)你在休整組織或切片的過程中脂肪組織意外出現(xiàn)時，你也可以使用前面的挖鑿技術(shù)。
2.調(diào)整組織塊的方向使脂肪*后接觸刀片切片時盡量避免脂肪先接觸刀片，因為脂肪會脫離包埋物，在切片上留下一個洞，如果不能避免，也要在其周圍加上包埋物，讓包埋物先接觸刀片。
3.保證刀片、臺面的干凈及組織塊的冷凍程度切片機的臺面和刀片必須保持干凈，假如你弄碎了一張片子必須即時用一塊干紗布清理干凈，但要防止刀片割手，如果你發(fā)現(xiàn)切出來的片子有條紋或者堆積成束，可能是組織粘著在刀片的下方了，必須除掉刀片上的組織，并將刀片清理干凈。
組織塊越冷就越容易切脂肪，只是其他非脂肪組織就變得堅硬難切，同時水性的組織會裂開，這就有必要在切片溫度的*冷端和*溫端取一個二者兼顧的中間值，以使脂肪和非脂肪組織都能切好。我一般將組織塊凍在-24度，可以獲得滿意的結(jié)果，冷凍噴霧劑有用，但要注意先清掉切片機內(nèi)的污穢。

原創(chuàng)作者：上海恒遠生物科技有限公司