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胎牛血清培養(yǎng)如何防止黑點(diǎn)生成

點(diǎn)擊次數(shù):35   發(fā)布時(shí)間:2024/10/28 9:46:25

近期有客戶向我們咨詢胎牛血清細(xì)胞培養(yǎng)中黑點(diǎn)如何防止生成?對(duì)此我司技術(shù)專員給出了詳細(xì)了解釋,為防止客戶由于操作方面而使黑點(diǎn)生成的辦法。因此定要做好以下幾點(diǎn)。方可使細(xì)胞培養(yǎng)順利。

1.盡可能地減少血清凍融次數(shù)。

2.培養(yǎng)基無需37℃水浴。

3.培養(yǎng)基保持zuiPH 值7.0-7.2。

4.嚴(yán)格控制配制培養(yǎng)基的水質(zhì),容器定期刷洗。

5.掌握細(xì)胞傳代的zui時(shí)機(jī),細(xì)胞切勿生長(zhǎng)過老。


 一、化凍 

將血清從-20 度冰箱中取出,室溫(或浸于自來水中)化凍(約需要30分鐘至2小時(shí),也可放于4度冰箱化凍過夜;化凍后若不馬上滅活,可以放入4度冰箱中暫時(shí)保存)


二、滅活

1.放入室溫的水浴鍋內(nèi)開始加熱(同時(shí)放入一個(gè)空的血清瓶,內(nèi)裝100ml自來水,插入一根溫度計(jì),溫度監(jiān)控以此為準(zhǔn))

2.當(dāng)溫度計(jì)顯示56度時(shí),停止加熱,改為間斷加熱,維持56度(±0.5度)30分鐘(±3分鐘;若不小心使溫度上升超過56度,則:若仍未超過60度,且時(shí)間很短,比如不超過5分鐘,則仍可使用;若超過60度,或者時(shí)間較長(zhǎng),則棄去不用,或者嘗試用于一些普通細(xì)胞的培養(yǎng))

3.取出,自然冷卻至室溫(約需1-3小時(shí)),可分裝或-20度繼續(xù)凍存。


三、分裝

1.轉(zhuǎn)入無菌間,在超凈臺(tái)內(nèi)將血清分裝入10ml離心管中(注意預(yù)先要將血清輕輕搖動(dòng)數(shù)周、混勻;用吸液管或吹大管吹出血清時(shí)要注意:不要吹出氣泡(血清很粘稠,很容易產(chǎn)生氣泡;如果產(chǎn)生氣泡, 則在酒精燈火焰上過一下)。

2.放入-20 度冰箱凍存。

3.全部操作約需要4-6小時(shí)。


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